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生長因子試劑盒注意事項和ELISA技術指南

2016-09-26 瀏覽次數:2265

  生長因子試劑盒實驗室注意事項:
    1、試劑不能與手接觸。
    2、要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈、擦干后,方可取用另一種試劑。
    3、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。
    4、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內。

   常見的ELISA常見技術指南:
    1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
    2、ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
    3、標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
    4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
    5、為了優化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
    6、若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
    7、當測定混合液體中的抗原時,如血清大鼠同型半胱氨酸,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。

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